Endonucleases, ktoré uznávajú špecifický základný sekvencie v rámci DNA špirály, vytváranie dvojitej-oblasť vymaniť zo DNA.

Poznámka: typu obmedzenie enzýmov naviazať na týchto stránkach uznanie, ale následne rezané DNA na rôznych miestach. Typu II reštrikčných enzýmov viazať a rezané do ich uznanie alebo cieľovej stránky.